实验动物学与实验医学  
实验动物微生物学、寄生虫学  
质量控制  
赵 勇  
实验动物微生物学和寄生虫学质量控  
制是实验动物标准化的重要内容之一。  
实验动物微生物和寄生虫控制的意义  
一、微生物和寄生虫存在部位  
实验动物来源于野生动物，在实验  
动物的饲养环境及动物体表、粘膜和消  
化道等部位，存在着种类繁多的微生物  
与寄生虫。  
二、表现形式和传播条件  
•
•
•
实验动物微生物一般有显性感染、  
隐性感染、病原携带状态、潜伏感  
染等四种表现形式。  
实验动物微生物传播必须具备传染  
源、传播途径和易感动物三个基本  
条件。  
实验动物多采用群体饲养，易造成  
相互传播。  
三、微生物和寄生虫的危害性  
1
、造成动物及实验损失，传染病可导致动  
物大批死亡。  
2
、威胁人类健康，如出血热、真菌感染人  
致病。  
3
4
5
、影响实验结果，如鼠肝炎使血清酶升高。  
、污染动物源性实验材料。  
、寄生虫的危害主要是掠夺营养、阻碍发  
育生长、产生毒性作用。  
第一节 等级分类及监测指标  
一、等级分类  
1、按照对实验动物微生物和寄生虫  
的控制程度，我国将实验动物分为普  
通动物、清洁动物、SPF动物和无菌动  
物四个等级。  
科研中使用的实验动物，其微生物  
和寄生虫的控制级别越高，其结果就  
越精确越可靠。  
2
、检测项目分类  
•
必须检测项目：是指在进行实验  
动物质量评价时必须检测的项目。  
•
必要时检测项目：是指从国外引  
进实验动物时；怀疑有本病流行  
时；申请实验动物生产许可证和  
实验动物质量合格证时必须检测  
的项目。  
二、普通动物(CV)：  
（
一）普通动物定义：  
要求不携带主要的人兽共患  
病病原体、动物本身的烈性传染  
病病原体及体外寄生虫的动物。  
（二）要求普通动物排除的微生物和  
寄生虫：  
1
、要求普通动物排除的病原菌：  
（
1）小鼠、大鼠：无。  
001新标准取消普通级小  
鼠、大鼠病原菌检测标准。  
2
（2）豚鼠、地鼠、兔：  
1）要求必须检测和排除的病原菌为：  
沙门菌。  
2）必要时检测及排除的病原菌为：  
单核细胞增生性李斯特杆菌、假结  
核耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌、  
皮肤病原真菌、念珠状链杆菌。  
（
3）犬、猴：  
1
）要求必须检测和排除的病原菌为：  
沙门菌、皮肤病原真菌、布鲁杆  
菌（犬）、志贺菌（猴）、结核分枝  
杆菌（猴）。  
2
）必要时检测和排除的病原菌：  
无。  
2
、要求普通动物排除的病毒：  
（1）小鼠、大鼠：  
无。  
新标准取消普通级小  
鼠、大鼠病毒检测标准。  
（
2）豚鼠、地鼠、兔：  
）必须检测和排除的病毒：  
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒  
豚鼠、地鼠）、兔出血症病  
毒（兔）。  
1
（
2
）必要时检测和排除的病毒：  
无。  
（
3）犬、猴：  
）必须检测和排除的病毒有：  
狂犬病毒（犬）、犬细小病毒  
犬） 、犬瘟热病毒（犬） 、  
1
（
传染性犬肝炎病毒（犬） 、猕  
猴疱疹病毒I型（B病毒，猴） 。  
2
）必要时检测和排除的病毒：  
无。  
3
、要求普通动物排除的寄生虫：  
（1）小鼠和大鼠：  
无。新标准取消普通级小鼠  
和大鼠寄生虫检测标准。  
（
2）豚鼠、地鼠、兔、犬和猴：  
体外寄生虫（节肢动物）、  
弓形虫。  
（三）普通动物（豚鼠、地鼠、  
兔、犬和猴等）生存的环境  
设施要求：  
1
2
、设施——开放系统：有防野  
鼠和昆虫的设施，环境和笼  
器具要定期消毒。  
、人员——进出要更衣换鞋等。  
3
4
、物品——垫料要消毒，  
饲料和饮水符合标准。  
、动物——做好检疫和防  
护，预防人兽共患病和  
动物烈性传染病。  
三、清 洁 动 物  
（
一）清洁动物定义：  
在普通动物标准基础上，  
不带有某些导致动物传染病  
的病原微生物及常见的体内  
寄生虫的动物。  
（二）要求清洁动物排除的  
微生物和寄生虫  
1
、要求清洁动物排除的病原菌：  
（1）小鼠和大鼠：  
1
）必须检测和排除的病原菌有：  
沙门菌、支原体、鼠棒状杆菌、  
泰泽病原体、支气管鲍特杆菌  
（大鼠）。  
2
）必要时检测和排除的病原菌有：  
单核细胞增生性李斯特杆菌、  
假结核耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔  
森菌、皮肤病原真菌、念珠状链杆  
菌、大肠埃希菌（大鼠）。  
（2）豚鼠、地鼠和兔：  
1
）必须检测和排除的病原菌有：  
多杀巴斯德杆菌、泰泽病原  
体、支气管鲍特杆菌（豚鼠、地  
鼠）。  
2
）必要时检测和排除的病原菌：  
无。  
（3）犬和猴：  
新标准不设清洁  
级犬和猴要排除的病  
原菌标准。  
2
（
、要求清洁动物排除的病毒：  
1）小鼠和大鼠：  
1
）必须检测和排除的病毒有：  
仙台病毒、小鼠肝炎病毒（小  
鼠）、鼠痘病毒（小鼠）、汉坦病  
毒（大鼠）。  
2
）必要时检测和排除的病毒有：  
汉坦病毒（小鼠）、淋巴细胞脉络  
丛脑膜炎病毒（小鼠）。  
（
2）豚鼠、地鼠和兔：  
1）必须检测和排除的病毒有：  
仙台病毒（豚鼠、地鼠）、兔出  
血症病毒（兔）。  
2
）必要时检测和排除的病毒：  
无。  
（
3）犬和猴：  
新标准不设清洁级犬和猴要排除  
的病毒标准。  
3
、要求清洁动物排除的寄生虫：  
1）小鼠和大鼠：  
）必须检测和排除的寄生虫有：  
（
1
体外寄生虫（节肢动物）、弓形  
虫、全部蠕虫。  
2
）必要时检测和排除的寄生虫  
有：兔脑原虫、卡氏肺孢子虫。  
（
2）豚鼠、地鼠和兔：  
）必须检测和排除的寄生虫有：  
全部蠕虫、卡氏肺孢子虫（兔）。  
）必要时检测和排除的寄生虫  
1
2
有：兔脑原虫（豚鼠、兔）、爱  
美尔球虫（地鼠、兔）。  
（3）犬和猴：  
新标准不设清洁  
级犬和猴要排除的寄  
生虫标准。  
（三）清洁动物生存的环境设施要求：  
1
2
、设施——屏障设施，严格控制人员、  
物品和环境空气的进出，饲养清洁  
级和SPF级动物。  
、人员——经更衣、淋浴、穿灭菌服、  
戴灭菌口罩和手套后，方可进入屏  
障设施。  
（三）清洁动物生存的环境设施要求：  
3
、物品——垫料、笼具、饲料和饮水等物  
品，经消毒和灭菌等处理后，方允许进  
入屏障系统。  
4
、动物——做好检疫和防护，动物不携带  
人兽共患病、动物烈性传染病、对动物  
本身及科学研究干扰较大的微生物和寄  
生虫。  
5
、空气——空气经过初效、中效和高效三  
级过滤，其洁净度达到1万级。  
三、SPF动物  
（
一）SPF动物定义：  
在清洁动物的基础上，  
要求不携带主要潜在感染或  
条件致病和对科学实验干扰  
大的微生物及寄生虫。  
（二）要求SPF动物排除的微生物和  
寄生虫：  
1
、要求SPF动物排除的病原菌：  
（
1）小鼠和大鼠：  
1
）必须检测和排除的病原菌有：  
嗜肺巴斯德杆菌、肺炎克雷  
伯杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓  
杆菌。  
（
1）小鼠和大鼠：  
）必要时检测和排除的病原  
菌有：  
肺炎链球菌、乙型溶血性链  
球菌。  
2
（
2）豚鼠、地鼠和兔：  
1
）必须检测和排除的病原菌有；  
嗜肺巴斯德杆菌、肺炎克雷伯杆  
菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、  
乙型溶血性链球菌（豚鼠）。  
2）必要时检测和排除的病原菌有：  
肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌  
（地鼠、兔）。  
（3）犬和猴：  
1
）必须检测和排除的病原菌有：  
钩端螺旋体。  
2
）必要时检测和排除的病原菌有：  
小肠结肠炎耶尔森菌、  
空肠弯曲杆菌。  
2
、要求SPF动物排除的病毒：  
1）小鼠和大鼠：  
）必须检测和排除的病毒有：  
（
1
小鼠肺炎病毒、呼肠弧病毒ш型、小鼠  
细小病毒（小鼠）；  
大鼠细小病毒RV株、大鼠细小病毒H-1  
株、大鼠冠状病毒/大鼠涎泪腺炎病毒  
（大鼠）。  
2
）必要时检测和排除的病毒有：  
小鼠脑脊髓炎病毒（小鼠）、  
小鼠腺病毒（小鼠）、多瘤病毒  
（小鼠）。  
（
2）豚鼠、地鼠和兔：  
1
）必须检测和排除的病毒有：  
小鼠肺炎病毒（豚鼠、地  
鼠）、呼肠弧病毒ш型（豚鼠、  
地鼠）、仙台病毒（兔）、轮状  
病毒（兔）。  
2
）必要时检测和排除的病毒有：  
无。  
（
3）犬和猴：  
1
）必须检测和排除的病毒有：  
猴逆转录D型病毒（猴）、猴免疫缺  
陷病毒（猴）、猴T细胞趋向性病毒І型  
（
（
猴）、猴痘病毒（猴）、狂犬病病毒  
犬）、犬细小病毒（犬）、犬瘟热病  
毒（犬）、传染性犬肝炎病毒（犬）。  
2
）必要时检测和排除的病毒：无。  
3
、要求SPF动物排除的寄生虫：  
1）小鼠和大鼠：  
）必须检测和排除的寄生虫  
有：鞭毛虫、纤毛虫。  
）必要时检测和排除的寄生  
虫：无。  
（
1
2
（
2）豚鼠、地鼠和兔：  
）必须检测和排除的寄生虫  
有：  
鞭毛虫、纤毛虫（豚鼠）。  
）必要时检测和排除的寄生  
虫有：  
无。  
1
2
（
2）犬和猴：  
1）必须检测和排除的寄生虫  
有：全部蠕虫、鞭毛虫、溶组  
织内阿米巴（猴）、疟原虫  
（
猴）。  
）必要时检测和排除的寄生  
虫有：溶组织内阿米巴（犬）。  
2
（三）SPF动物生存的环境设施要求：  
1
2
、设施——屏障设施，严格控制人员、  
物品和环境空气的进出，饲养SPF动物。  
、人员——经更衣、淋浴、穿灭菌服、  
戴灭菌口罩和手套后，方可进入屏障  
设施。  
（
三）SPF动物生存的环境设施要求：  
3
、物品——垫料、笼具、饲料和饮水等物  
品，经消毒和灭菌等处理后，方允许进  
入屏障系统。  
4
、动物——做好检疫和防护，动物不携带  
人兽共患病、动物烈性传染病、对动物  
本身及科学研究干扰较大的微生物和寄  
生虫。  
5
、空气——空气经过初效、中效和高效三  
级过滤，其洁净度达到1万级。  
五、无菌动物和悉生动物  
（
一）无菌动物和悉生动物定义：  
1、无菌动物：要求不携带任  
何以现有手段可检出的微生物和  
寄生虫。  
2
、悉生动物：在无菌动物体  
内人为植入一种或数种微生物的  
动物。  
（二）要求无菌动物排除的微生  
物和寄生虫：  
无任何可查到的微生物和寄生虫。  
（三）无菌动物和悉生动物生存  
的环境设施要求：  
1
2
、设施——隔离环境（隔离器）：  
采用无菌隔离装置以饲养无菌  
或无外来污染的动物。  
、人员——人员不能进入隔离环  
境内，只能通过隔离装置的手套  
进行操作。  
（三）无菌动物和悉生动物生  
存的环境设施要求：  
3
4
、物品——垫料、笼具、饲料和饮水等物  
品，经灭菌等处理后才能进入屏障系统。  
、动物——无菌动物无任何可查到的微生  
物和寄生虫，悉生动物只检测到人为植  
入的微生物或寄生虫。  
5
、空气——空气经过高效过滤，其洁净度  
达到100级。  
不同等级实验动物的特点比较  
评价项目  
无菌动物 SPF动物  
清洁动物 普通动物  
传 染 病  
寄 生 虫  
实 验 结 果  
应用动物数  
无
无
较少  
较少  
明确  
较少  
较好  
可能好  
较低  
约80%  
可能  
较高  
有或可能有  
有或可能有  
有疑问  
多（或大量）  
较差  
无
少
明确  
少
明确  
少
统 计 价 值  
长 期 实 验  
自然死亡率  
很好  
可能好  
很低  
约100%  
可能  
好
可能好  
低
困难  
高
长期实验存活率  
实验的准确设计  
约90%  
可能  
高
约40%  
不可能  
低
实验结果讨论价值 很高  
第二节实验动物常见感染性疾病  
一、实验动物感染性疾病概念：  
*
实验动物常见感染性疾病包括——人  
兽共患病、动物烈性传染病、一般性疾  
病、寄生虫疾病。  
*
人兽共患病——指人类也可感染发病  
的一类动物疾病。  
病原体感染的表现形式——显性感染、  
隐性感染、病原携带状态、潜伏感染。  
*
（
一）导致人兽共患病的主要病原体：  
1
、病毒：流行性出血热病毒、淋巴  
细胞性脉络丛脑膜炎病毒、狂犬病  
病毒、猴疱疹病毒（B病毒）等。  
（
一）导致人兽共患病的主要病原体：  
2
、细菌：沙门氏菌、布氏杆菌、志贺氏  
菌、结核分枝杆菌、猪链球菌等。  
、真菌：皮肤病原真菌（石膏样毛癣菌、  
3
石膏样小孢子菌、羊毛状小孢子菌、新  
生隐球菌、荚膜组织胞浆菌）等。  
4
5
、寄生虫：弓形体等寄生虫。  
、钩端螺旋体病  
（
二）主要动物烈性传染病：  
、病毒：鼠痘病毒（小鼠脱脚  
1
病病毒）、兔出血症（兔瘟）病  
毒、犬细小病毒（急性出血性肠  
炎）、犬瘟热病毒等。  
（
三）一般疾病病原体：  
1
、病毒：小鼠肝炎病毒、仙台  
病毒、猴D型反转录病毒等。  
、细菌：多杀巴氏杆菌、泰泽  
氏菌、鼠棒状杆菌、肺支原体等。  
2
3
、寄生虫：  
多种体内寄生虫，如球虫、  
疥螨。  
二、病毒性疾病：  
（一）流行性出血热（肾综合征出血热  
HFRS）：  
1、传染源——汉坦病毒。  
带病毒黑线姬鼠和褐家鼠为主要传染  
源，实验大鼠也偶尔传播。  
2
、传播途径——污染尘埃飞扬形成气溶  
胶吸入感染。带病毒的血、尿污染人皮  
肤破损处，也使人患病。  
（
（
一）流行性出血热  
肾综合征出血热HFRS）：  
3
、易感者——人、大鼠、小鼠、  
豚鼠、兔。  
4
、症状——潜伏期14天，人感染  
后出现高热、出血、休克、肾功  
能受损和循环衰竭，严重者死亡。  
（
二）淋巴细胞性脉络丛脑膜炎  
1
、传染源——淋巴细胞性脉络  
丛脑膜炎病毒。带病毒野小  
鼠或实验小鼠为传染源。  
2
、传播途径——带病毒小鼠的  
分泌物、排泄物污染，吸血  
昆虫传播，胎盘垂直传播。  
（
二）淋巴细胞性脉络丛脑膜炎  
3
、易感者——人，小鼠、  
猴、豚鼠、大鼠、地鼠、  
兔、狗、鸡等。  
4
、症状——人感染后表现类似流  
感样症状，有三种表现：大脑型、  
内脏型、迟发型。  
（三）鼠痘—小鼠传染性脱脚病：  
1
2
3
、传染源——鼠痘病毒。患病或  
带病毒小鼠是传染源。  
、传播途径——接触病鼠的渗出  
物、分泌物及其污染的物品。  
、易感动物——小鼠，特别是A  
系、C3H、DBA/2、BALB/C、  
CBA等品系小鼠。  
三、细菌性疾病  
（
一）沙门氏菌病：  
1
、传染源——沙门氏菌。携带该  
菌的野鼠、苍蝇、动物粪便，病  
鼠是传染源。  
2
、传播途径——粪便污染垫料、  
饲料、饮用水后，经消化道感染。  
（
一）沙门氏菌病：  
3
4
、易感动物——大鼠、小鼠、豚  
鼠、兔。  
、症状——食少和腹泻，急性暴  
发型可导致动物迅速死亡。  
（
二）支原体病：  
1
、传染源——支原体（肺支原体、  
溶神经支原体和关节炎支原体）。  
患病或携带病原体的小鼠、大鼠。  
2
、传播途径——带菌母鼠舔仔鼠，  
气溶胶传播，经污染笼具间接接  
触。  
（
二）支原体病：  
3
4
、易感动物——大鼠、小鼠。  
、症状——  
（
1）肺支原体——呼吸系统疾病：  
鼻炎、肺炎，并发中耳炎：“歪头  
病”。母鼠死胎或不育。  
（
2）溶神经支原体——小鼠旋转病。  
（3）关节炎支原体——大鼠多发性  
关节炎。  
四、寄生虫疾病：  
（
一）弓形体病：  
1
、传染源——袭地弓形虫。其感  
染性卵囊和含弓形体的包囊可感  
染导致发病。  
2
、传播途径——成熟卵囊污染的  
食物或含弓形体包囊的肉类被食  
用。  
（
一）弓形体病：  
3、易感者——人，猫、小鼠、大鼠、  
家兔、豚鼠、地鼠、犬、猴。  
4、症状——在脏器（肠道、眼、心、  
脑、肺、肌肉、肝、脾等）  
形成肉芽肿性炎症和坏死，并引起相  
应症状。  
（
二）、兔球虫病  
各种实验动物均有球虫寄生，其中寄生于兔的球虫对兔  
的危害最大。目前寄生于兔的球虫约为13种，均属艾美尔球  
虫。兔球虫病主要表现为食欲减退、精神沉郁、动作迟缓、  
腹泻和便秘交替出现，病兔消瘦，可视粘膜轻度黄染。死亡  
率40～70%。  
1
、病原：球虫卵囊在外界环境中，当温度为20℃，湿度  
55～75％时，夏季2～3天发育成熟，具有感染性。卵囊对  
化学药品和低温的抵抗力很强。但卵囊对干燥和高温敏感，  
在80℃热水中10秒钟死亡，在沸水中立即死亡。紫外线对  
各个发育阶段的球虫都有很强的杀灭作用。  
（
二）、兔球虫病  
2
3
、易感动物：各种家兔，尤以3月龄家兔最敏感，且  
死亡率高。  
、传播途径：通过食物和饮水，仔兔感染主要通过  
哺乳时吃到乳房上污染的卵囊。饲养员、工具、野  
鼠和苍蝇等也可机械地搬运球虫卵囊而传播本病。  
4
、症状和病变：球虫对上皮细胞的破坏，有毒物质  
的产生以及肠道细胞的，综合作用是引起症状和病  
变的主要因素。  
（
二）、兔球虫病  
5、检测：饱和盐水漂浮法检查粪便卵囊。  
6
、预防与控制：许多药物可以用于预防和治疗兔球  
虫病，如磺胺喹恶嘛预防用药以0.25％混于饲料中，  
连续30天，治疗用药以0.1％连用二周。其它药物  
如氯苯胍、兔球灵等等许多药物均可应用。兔场要  
保持干燥，幼、成年兔分笼饲养，发现病兔立即隔  
离治疗；搞好环境卫生，消灭鼠类。  
（三）、疥 螨  
疥螨是一种永久性体外寄生虫，寄生于宿主的皮肤表  
层内。疥螨对宿主的特异性并不十分严格，许多动物包括  
人都可以被感染。与实验动物有关的，且危害较大的是兔  
疥螨和犬疥螨。其主要特征是皮肤发炎剧痒脱毛等，严重  
者死亡。  
1
、病原：疥螨的生活史是直接的，发育过程包括卵、幼  
虫、若虫和成虫四个阶段。  
疥螨钻入宿主表皮挖掘隧道，雌虫在隧道内产卵，卵孵化为幼  
虫，幼虫有三对足。幼虫脱化变为若虫，若虫最后变为成虫。雄虫  
于交配后死亡。  
（三）、疥 螨  
2
、感染途径：主要经皮肤、耳道，通过直接接触病兔  
病犬）、污染的房舍和用具而感染。多发于冬季和秋  
末春初。  
、症状：兔先由口、鼻周围及脚部发病，以后患部有结  
（
3
节形成，互相粘连结痂，使患部变硬。以后患部向周围  
蔓延。病兔奇痒，迅速消瘦。  
犬多先发于头部、口鼻眼耳及胸部、后遍及全身，  
皮肤发红，有疹状小结，皮下组织增厚，形成黄痂。病  
犬奇痒，因摩擦而有严重的脱毛现象。  
（三）、疥 螨  
4
5
、诊断：病变部位皮肤刮取物检查有大量虫体可确诊。  
、预防与控制：患病动物及时隔离。  
治疗前，在患部及周围剪毛，除去污垢和痂皮，尽  
量避免出血。从动物身上清除下来的污物全部销毁，用  
具全部消毒。动物饲养密度不宜过大。对动物房一切用  
具均应保持清洁，保持环境卫生；引入动物要进行仔细  
全面的检查。消灭动物房的传播媒介如野生啮齿类等。  
实验动物传染病的卫生防疫  
–
–
–
防疫原则  
检疫  
疾病控制  
防疫原则  
1
2
.隔离饲养，防止交叉感染。  
.引进动物要严格检疫：  
从可信赖的单位引进动物；  
按国家标准严格检测。  
3
4
.坚持卫生消毒制度：  
定期对动物房舍和饲养用具进行消毒。  
.饲养管理人员要定期做健康检查  
防疫原则  
5
6
.自繁自养多级保种，提高自我更新能力；  
.对实验动物进行免疫接种，提高其防病治  
病能力；  
.严格防止野生动物进入实验动物场所，对  
死亡动物进行无害化处理。  
7
检疫与疾病控制  
1
. 引进动物的检疫：隔离检疫，确定无传  
染病或隐性感染。  
一般隔离观察时间：  
小鼠、大鼠、豚鼠、兔 3~7天  
犬、猫  
20~30天  
灵长目动物  
90天以上  
检疫与疾病控制  
2
. 定期进行微生物学监测：  
按照国家标准进行，以了解  
动物的健康状况及是否存在隐性  
感染，及早发现隐患，减少损失。  
检疫与疾病控制  
3
.对发病动物的检查：  
1
2
3
4
5
) 病变检查  
) 细菌学检查  
) 病毒学检查  
) 真菌学检查  
) 寄生虫检查  
对发病动物的检查  
1
. 病变检查：  
体表检查：死后30min内进行，检查是否有  
皮 肤疾患，外科损伤。  
尸体剖检：切开皮肤，检查动物的乳腺区、  
腹股沟和腋窝淋巴结、颌下唾液腺和淋巴结。  
胸、腹腔检查：胸腔；气管；肺；心脏；  
–
–
–
肝和胆囊；肠及肠系膜淋巴结；脾；肾脏；  
子宫、性腺、膀胱等。  
对发病动物的检查  
2
. 细菌学检查  
进行病原菌的分离与培养，结合病理检  
查结果作出判断。  
对发病动物的检查  
3
•
. 病毒学检查：  
血清学检查：HA、HI、HFA、IEA和ELISA  
病毒分离培养与鉴定  
•
•
病毒颗粒抗原或核酸的检出：  
血凝素抗原—HA、HI  
病毒颗粒—电镜或免疫电镜  
病毒基因组或核酸—PAGE、PCR  
对发病动物的检查  
3
. 病毒学检查  
•
潜在病毒的激活：  
–
应用免疫抑制剂或应激剂降低动物机体  
抵抗力，激活潜在病毒  
•
抗体产生试验：  
–
将待检动物的组织悬液接种于无常见病  
毒的动物，1个月后采血，检查是否产生  
抗体。  
对发病动物的检查  
4
. 真菌学检查：  
采用分离培养法，用沙氏培养基。  
皮肤真菌—25℃培养  
深部真菌—37℃培养  
结合菌落特点、镜下染色检查和生化反应  
结果等进行诊断。  
对发病动物的检查  
5
. 寄生虫检查：  
体外寄生虫：  
肉眼观察；透明胶纸粘取毛样  
肠道寄生虫：  
采集粪便，肉眼观察有无虫体；漂浮法、  
沉淀法检查有无虫卵、原虫卵囊或包囊。  
检疫与疾病控制  
5
. 寄生虫检查：  
血液寄生虫：  
采集末梢血液，制成薄涂片，染色镜检。  
组织内寄生虫：  
解剖动物时，对可疑部位做组织压片、  
切片检查。  
疾病控制  
在医学和兽医学研究领域，疫苗接种和药物治  
疗是防制传染病的有效手段。  
但是实验动物一般不采取疫苗接种和药物治疗，  
主要由于实验动物的特殊性：  
1
2
、应用疫苗或治疗制剂可能干扰实验结果。  
、经过治疗或免疫的动物，外表健康，但可能是  
带菌或带毒者，可能成为潜在的传染源。  
、对于小型实验动物，治疗措施可能在经济上不  
合算。  
3
疾病控制  
因此在实验动物饲养和动物实验过程中，只能采  
取严格的饲养管理和卫生防疫制度以达到预防疾病的  
目的。  
实验动物卫生防疫主要包括以下几个方面的内容：  
1
2
3
4
、平时的预防措施  
、发生疫病时的扑灭措施  
、消毒措施  
、隔离措施  
1
、平时的预防措施（1）  
1
）饲养人员严格按照饲养管理规程和卫生防疫  
规程进行操作，作好记录，发现情况，及时汇  
报。  
2
）饲养人员工作期间不得接触非本单位的家畜  
家禽，防止野禽、野生动物侵入场内。  
）严格遵守卫生消毒制度，降低环境设施中的  
3
病原体含量。工作人员头脑中树立严格的消毒  
观念，万万不能麻痹大意，更不能敷衍了事。  
1
、平时的预防措施（2）  
4
5
）不从疫区引进实验动物。  
）饲料、垫料的存放环境应干燥、通风，饲  
料应达到相应的国家标准。  
6
）不同种类，不同品系、不同年龄的动物应  
分开饲养，防止交叉感染，严防饲养人员串岗，  
外来购买或领用实验动物者不能进入饲养环境。  
1
、平时的预防措施（3）  
7
）有关人员每年进行健康检查，患有传  
染病的人员不能从事实验动物工作。  
）定期检疫，发现情况及时按有关规定  
处理。  
）如发现疾病，及时采取措施，或隔离，  
或淘汰。  
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9
2
、发生疫病时的扑灭措施（1）  
1
2
）一旦发现，及时上报上级管理部门和防疫  
部门，并通知邻近单位作好预防工作。  
）迅速隔离患病动物，污染的环境和器具紧  
急消毒，正在进行实验的动物应停止实验  
观察或淘汰。  
3
）若发生危害性大的疫病如鼠痘、流行性出  
血热等应采取封锁等综合性措施。划定封  
锁区域，并坚决执行封锁制度。  
2
、发生疫病时的扑灭措施（2）  
4
）病死或淘汰的动物应采取焚烧等综合  
性措施合理处理，及时处理传染源，切  
断传染病流行的环节。  
3
、消毒措施（1）  
1）预防性消毒：结合平时的饲养管  
理和卫生防疫制度，定期对实验动物房、  
笼具架、饮水等进行定期消毒，以达到  
预防一般传染病的目的。  
3
、消毒措施（2）  
2
）随时消毒：在发生传染病时，为了及时  
消灭刚从患病动物体内排出的病原体而采取的  
消毒措施，消毒的对象包括患病动物舍、隔离  
场地、被患病动物分泌物、排泄物污染的和可  
能被污染的一切场所、笼具等。通常在解除封  
锁和隔离之前进行定期的多次消毒，患病动物  
舍应每天和随时进行消毒。  
3
、消毒措施（3）  
3）终末消毒：在患病动物解除隔  
离、完全痊愈或死亡后，或在疫  
区解除封锁之前，为了消灭疫区  
内可能残留的病原体所进行的全  
面、彻底的消毒。  
4
、隔离措施  
•
隔离患病动物和可疑感染的动物是  
防制传染病的重要措施。  
•
隔离的目的：控制传染源，防止  
健康动物继续受到传染，将疫情控  
制在最小的范围内。  
隔离方法  
1
） 隔离地点：不易扩散病原体、消毒处理方  
便。  
2
） 严格遵守隔离规定 严格控制人员和动物  
出入及接近隔离场所。  
3
）严格执行消毒制度 污染的和可能污染的  
用具、饲料、粪便等要经严格消毒方可拿出。  
标本及废弃物的处理  
标本处理：  
动物血液及组织标本立即按实验  
要求进行分离、冻存或固定等处理  
后存放。  
废弃物处理  
废弃物是指将要丢弃的所有物品。在实验室内，废弃物最终  
的处理方式与其污染被清除的情况是紧密相关的。  
废弃物处理的首要原则是所有感染性材料必须在实验室内清  
除污染、高压灭菌或焚烧。  
动物的尸体（包括冰冻切片检查后的组织）、使用过的垫料、  
粪便、污水及其它排泄物等不得随意丢弃，应当经过初步处  
理如包裹或焚烧后再放置在由主管部门（如学校爱卫会、实  
验动物中心等）指点的地点，统一进行无害化处理。  
污染性材料和废弃物的处理  
要对感染性物质及其包装物进行鉴别并分别进行处理，相  
关工作要遵守国家和国际规定。废弃物可以分成以下几类：  
1
（
、可重复或再使用，或按普通家庭废弃物丢弃的非污染  
非感染性）废弃物。  
、污染（感染性）锐器——皮下注射用针头、手术刀、刀  
2
子及破碎玻璃；这些废弃物应收集在带盖的不易刺破的容  
器内，并按感染性物质处理。。  
3、通过高压灭菌和清洗来清除污染后重复或再使用的污染  
材料。  
4
、高压灭菌后丢弃的污染材料。  
、直接焚烧的污染材料。  
5
废弃物处理  
清除污染：  
1、高压蒸汽灭菌是清除污染时的首选方法。需  
要清除污染并丢弃的物品应装在容器中（如根  
据内容物是否需要进行高压灭菌而采用不同颜  
色标记的可以高压灭菌的塑料袋）。  
高压灭菌过的废弃物可以在其他地方焚烧后处  
理，或在指定垃圾场掩埋处理。  
废弃物处理  
大多数情况下，下列组合可以确保正确装载  
的高压灭菌器的灭菌效果：  
1
2
3
4
、134℃、3min  
、126℃、10min  
、121℃、15min  
、115℃、25min  
废弃物处理  
对于高压灭菌后重复使用的污染（有潜在  
感染性）材料：  
任何高压灭菌后重复使用的污染（有潜在  
感染性）材料不应事先清洗，任何必要的  
清洗、修复必须在高压灭菌或消毒后进行。  
废弃物处理  
清除污染：  
2、消毒剂：应在每个工作台上放置盛放废  
弃物的容器、盘子或广口瓶，最好是不易  
破碎的容器（如塑料制品）。当使用消毒  
剂时，应使废弃物充分接触消毒剂（即不  
能有气泡阻隔），并根据所使用消毒剂的  
不同保持适当接触时间。盛放废弃物的容  
器在重新使用前应高压灭菌并清洗。  
废弃物处理  
含氯消毒剂的推荐使用浓度  
废弃物处理  
清除污染：  
、焚烧：在处理那些经过或事先未经清除污  
3
染的动物尸体以及解剖组织或其他实验室废  
弃物时，焚烧是一种有效的方法。  
只有在实验室可以控制焚烧炉的条件下，才  
能用焚烧代替高压灭菌来处理感染性物质。  
废弃物处理  
废弃的污染（有潜在感染性）材料在丢弃前应放置  
在防渗漏的容器（如有颜色标记的可高压灭菌塑料袋）  
中高压灭菌。高压灭菌后，物品可以放在运输容器中运  
送至焚烧炉。如果实验室中配有焚烧炉，则可以免去高  
压灭菌：污染材料应放在指定的容器（如有颜色标记的  
袋子）内直接运送到焚烧炉中。运输用的容器应是防渗  
漏的，有密闭的盖子。如要重复使用，这些容器在送回  
实验室再次使用前，应进行消毒清洁。  
污染材料的焚烧必须得到公共卫生、环保部门以及  
实验室的批准。  
清除局部环境的污染  
•
清除表面污染时可以使用次氯酸钠（NaOCl）溶液：含有  
1
％有效氯的溶液适于普通的环境卫生设备。处理高危环  
境时，建议使用高浓度（5 g/L）溶液。  
•
•
含有3％过氧化氢的溶液也可以作为漂白剂的代用品。  
可以通过加热多聚甲醛或煮沸福尔马林所产生的甲醛蒸气  
熏蒸来清除房间和仪器的污染。这是一项需要由专门培训  
的专业人员来进行的、非常危险的操作。产生甲醛蒸气前，  
房间的所有开口（如门窗等）都应用密封带或类似物加以  
密封。熏蒸应当在室温不低于21℃且相对湿度70%的条件  
下进行。  
个人防护  
•
•
实验前的准备：  
实验设计过程：3R原则  
Reduction 是指在科学研究中使用较少量的动物获取同样多的试验数  
据或使用一定数量的动物能获得更多试验数据的方法。  
Replacement 是指使用其它方法而不用动物所进行的试验或其他研究  
课题达到某一试验目的。或者说是使用没有知觉的试验材料代替以  
往使用神志清醒的活的脊椎动物进行试验的一种科学方法。  
Refinement 是指通过改进和完善实验程序减轻或减少给动物造成的疼  
痛和不安，提高动物福利的方法。  
•
实验器具准备  
实验过程中注意  
实验结束后清理  
实验总结  
•
•
•
个人防护  
•
实验室所用任何个人防护装备应符合  
国家有关标准的要求。  
•
实验室对个人防护装备的选择、使用、  
维护应有明确的书面规定、程序和使用  
指导。  
个人防护  
•
实验室防护服  
实验室应确保具备足够的有适当防护  
水平的清洁防护服可供使用。不用时，只  
应将清洁的防护服置于专用存放处。污染  
的防护服应于适当标记的防漏袋中放置并  
搬运。  
每隔适当的时间应更换防护服以确保  
清洁，当知道防护服已被危险材料污染应  
立即更换。离开实验室区域之前应脱去防  
护服。  
个人防护  
当具潜在危险的物质极有可能溅到工  
作人员时，应使用塑料围裙或防液体的长  
罩服。在这种工作环境中，如必要，还应  
穿戴其它的个人防护装备，如手套、防护  
镜、面具、头部面部保护罩等。  
个人防护  
•
面部及身体保护  
处理样本的过程中，如可产生含生物  
因子的气溶胶，应在适当的生物安全柜中  
操作。  
在处理危险材料时应有许可使用的安  
全眼镜、面部防护罩或其他的眼部面部保  
护装置可供使用。  
个人防护  
•
手套  
手套应在实验室工作时可供使用，以防生物危险、化学品、  
辐射污染，冷和热，产品污染，刺伤、擦伤和动物抓咬伤等。  
手套应按所从事操作的性质符合舒服、合适、灵活、握牢、  
耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防  
护。应对实验室工作人员进行选择手套，使用前及使用后的配  
戴及摘除等培训。  
应保证：  
1
2
） 所戴手套无漏损；  
） 戴好手套后可完全遮住手及腕部，如必要，可覆盖实  
验室长罩服或外衣的袖子；  
3
4
） 在撕破、损坏或怀疑内部受污染时更换手套；  
） 手套为实验室工作专用。在工作完成或中止后应消毒、  
摘掉并安全处置。  
个人防护  
•
鞋
鞋应舒适，鞋底防滑。推荐使用皮  
制或合成材料的不渗液体的鞋类。在  
从事可能出现漏出的工作时可穿一次  
性防水鞋套。在实验室的特殊区域  
（
例如有防静电要求的区域）或BSL-  
和BSL-4实验室要求使用专用鞋（例  
如一次性或橡胶靴子）。  
3
个人防护  
•
呼吸防护  
当要求使用呼吸防护装备（如面具、个人呼  
吸器、正压服等）时，其使用和维护的作业指导  
书应包括在相应活动的安全操作程序手册中。呼  
吸器应只能按照作业指导书及培训的要求使用。  
应安排工作场所监控、医学评估和对呼吸器  
使用者的监督，以确保其始终正确使用该类装备。  
应对呼吸器作个体适合性测试。  
进行容易产生高危害气溶胶的操作时，要求  
同时使用适当的个人防护装备、生物安全柜和/或  
其它物理防护设备。  
个人防护  
•
洗手／清除手部污染  
处理生物危害性材料时，只要可能均必须戴合适的手套。但是这  
并不能代替实验室人员需要经常地、彻底地洗手。处理完生物危害  
性材料和动物后以及离开实验室前均必须洗手。  
大多数情况下，用普通的肥皂和水彻底冲洗对于清除手部污染就  
足够了。但在高度危险的情况下，建议使用杀菌肥皂。手要完全抹  
上肥皂，搓洗至少10 秒钟，用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾  
擦干（如果有条件，可以使用暖风干手器）。  
推荐使用脚控或肘控的水龙头。如果没有安装，应使用纸巾或毛  
巾来关上水龙头，以防止再度污染洗净的手。  
如果没有条件彻底洗手或洗手不方便，应该用酒精擦手来清除双  
手的轻度污染。  
第三节 实验动物的微生物和寄生虫监测  
一、监测的意义：  
监测是保证实验动物质量及标准化的  
必要手段。及时诊断疾病，发现并控  
制其传播，才能保证实验动物的健康。  
二、监测的程序：  
实验动物（编号） 体外检查  
取血（病毒或其它病原检测）  
皮肤取样（体外寄生虫和真菌检  
测） 无菌解剖（气管分泌物、肠  
内容物、脏器分离细菌；脏器、肠内  
容物、粪便的体内寄生虫检查）  
三、监测频率  
•
•
•
•
普通动物：每三个月至少检测动物一次；  
清洁动物：每三个月至少检测动物一次；  
SPF动物：每三个月至少检测动物一次；  
无菌动物：每年检测一次，每2~4周检查  
一次动物的生活环境标本和粪便标本。  
重 点 掌 握 内 容  
1
2
、掌握普通动物、清洁动物、SPF动  
物和无菌动物的概念。  
、掌握人兽共患病的主要疾病名称和  
特征。  
3
、掌握防疫原则和消毒措施。  
4、3R原则